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臨床基因擴增檢驗導管室的設計

(1)臨床基因擴增檢測導管室的區(qū)域設計原則。手術(shù)室凈化采用空氣潔凈技術(shù)對微生物污染采取程度不同的控制，達到控制空間環(huán)境中空氣潔凈度適于各類手術(shù)之要求；并提供適宜的溫、濕度，創(chuàng)造一個潔凈舒適的手術(shù)空間環(huán)境。醫(yī)院凈化工程不同級別的層流手術(shù)室其空氣潔凈度標準不同，例如國內(nèi)標準I級層流手術(shù)室的標準為潔凈度5級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數(shù)，≤100顆或每升空氣中≤3.5 顆。II級層流手術(shù)室的標準為潔凈度6級，每立方尺空氣中≥0.5μm的塵粒數(shù)，≤1000顆或每升空氣中≤35顆。手術(shù)室凈化廠家除了具備一般手術(shù)室常規(guī)器械外，應有閉路電視、空調(diào)、高級電刀（進口），為保證不因意外停電影響手術(shù)，醫(yī)院應備有發(fā)電設施。不使手術(shù)室地面污染，最好使用交換車等現(xiàn)代推車。

 原則上進行臨床研究基因技術(shù)擴增檢驗導管室應當可以設置具有以下工作區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增反應產(chǎn)物結(jié)構(gòu)分析區(qū)。這 4 個區(qū)域在物理學習空間上必須是完全沒有相互影響獨立的，各區(qū)域無論是在空間上還是在使用中，應當能夠始終都是處于一個完全的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。根據(jù)學生使用電子儀器的功能，區(qū)域可適當合并。例如我們使用情況實時熒光 PCR 儀，擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物數(shù)據(jù)分析區(qū)可合并；采用不同樣本企業(yè)處理、核酸提取及擴增目標檢測為一體的自動化分析儀，則標本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物主要分析區(qū)可合并。各區(qū)的功能是：

1.試劑進行儲存和準備區(qū)：貯存實驗試劑的制備、試劑的分裝和擴增技術(shù)反應體系混合液的準備，以及一個離心管、吸頭等生活消耗品的貯存和準備。

2.樣品制備區(qū)：核酸（RNA、DNA）提取、儲存、加入擴增反應管。 涉及臨床樣本的作業(yè)，應符合生物安全二級導管室防護設備、個人防護、操作規(guī)范的要求。

3.擴增區(qū)域: cdna 合成，擴增和檢測。

4.擴增產(chǎn)物分析區(qū):對擴增片段的進一步分析和測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。

（二）臨床研究基因進行擴增技術(shù)檢驗導管室的空氣流向。

可根據(jù)標本制備區(qū)的試劑存儲和制備區(qū)，對導管室的氣流進行臨床基因擴增試驗，防止擴增產(chǎn)物跟隨氣流進入預擴增區(qū)。可根據(jù)試劑儲存區(qū)標本制備區(qū)放大區(qū)的氣壓進行。它可以通過安裝排風機、負壓排氣裝置或其他可行的方式來實現(xiàn)。

（>3）工作區(qū)儀器設備配置標準。

1.試劑儲存和準備區(qū)

 冰箱（1）2～8 ℃，-20 ℃ 以下。

（2）混勻器。

（3）微采樣器（覆蓋0.2-1000l）

  (4)可移動紫外線燈(靠近工作臺)。

（5）耗材：一次性手套、耐高壓離心管、原型吸頭。

（6）專用工作服和工作鞋(套)。

（7）專用網(wǎng)絡辦公生活用品。

 2.標本制備區(qū)

（1）2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。

（2）高速離心機。

（3）混勻器。

  (4)水浴槽或加熱模塊。

  (5)微量取樣器(覆蓋0.2-1000微升)

（6）可移動進行紫外燈（近工作就是臺面） 。

（7）生物安全柜。